本文源自微信公众号：睦科生物
精确取材
制作病理切片的首要步骤是精确取材，这要求操作者不仅具备深厚的组织学、解剖学、病理学理论知识，还需掌握熟练的实际操作技能。取材时必须遵循以下原则：
材料时效性：确保组织离体后立即进行固定，以保留其原始形态结构。
尺寸适宜：组织块大小应控制在约2.0×2.0×0.3cm，便于固定液快速均匀渗透。
避免挤压：使用锋利刀具一次性切割，避免来回锉动或过度夹持，以防组织变形。
规范部位：根据病变部位和性质，准确解剖并规范化取材。
切面选择：根据器官结构特点，合理选择纵切或横切，以最佳展示组织形态。清洁处理：去除组织上的血液、污物等，保持其清洁后固定。
形态保持：尽量在固定后保持组织自然展平，减少收缩变形。
及时固定
固定是制片过程中至关重要的一步，无法事后补救。组织应迅速置于固定液中，常用10%甲醛，标本与固定液比例约为1:4~20。固定旨在防止细胞自溶与腐败，保持细胞成分的稳定性和结构完整性。
彻底脱水与透明
脱水过程利用脱水剂置换组织内水分，为后续透明步骤做准备。脱水是否彻底直接影响组织透明的效果。随后，组织需经过透明处理，使有机溶剂能够渗透其中。
浸蜡与包埋
浸蜡是将组织完全浸入熔化的石蜡中，以取代透明剂。之后，将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中，待石蜡凝固，组织即被包埋其中，为后续切片提供稳定支撑。
精细切片与贴片
注意事项
修整蜡块：确保蜡块平整无瑕疵。
准备工具：毛笔、镊子、锋利切片刀等。
安装蜡块与切片刀：确保切片刀紧固无震动。
切片：控制切片厚度为4~6μm，以保证观察效果。
展片：利用恒温水面展平蜡带，消除褶皱。
贴片与烘片：将展平的蜡片移至载玻片上，置入烘烤箱内烘烤，去除多余石蜡，增强切片附着力。
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染色与封片
采用经典的苏木素-伊红染色法（H.E染色法），使细胞核等碱性物质呈现蓝色，细胞质等嗜酸性物质呈现红色。染色完成后，进行封片处理，以保护切片并便于长期保存和观察。这一步骤不仅展现了组织的微观结构，也为病理诊断提供了重要依据。
睦科生物简介
睦科生物提供专业生物医学科研服务平台，公司全职人员35名，具备5年以上临床前CRO服务经验人员10余名。公司设有科创中心、动物实验学、分子生物学、生物材料学、病理生理学和药物检测学六大技术服务平台，以“推动医学科研，专注成果转化，提升国人健康”为使命，包容失败，激励创新，在与客户合作开展基础研究的前提下，聚焦有应用前景的技术或潜在产品，团队攻关，为客户形成设计或产品，实现成果转化。
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